matlab选择激发波长,【求助】怎么确定一个物质的激发波长和发射波长?

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参考一下这个,不知道有没有帮助

任何荧光物质都具有激发光谱和发射光谱。由于斯托克斯位移,荧光发射波长总是大于激发波长。并且,由于处于基态和激发态的振动能级几乎具有相同的间隔,分子和轨道的对称性都没有改变,荧光化合物的荧光发射光谱和激光谱形式呈大同小异的”镜象对称”关系。

荧光激发光谱是通过测量荧光体的发光通量随波长变化而获得的光谱。它是荧光强度对激发波长的关系曲线,它可以反映不同波长激发光引起荧光的相对效率;荧光发射光谱是当荧光物质在固定的激发光源照射后所产生的分子荧光,它是荧光强度对发射波长的关系曲线。它表示在所发射的荧光中各种波长组分的相对强度。由于各种不同的荧光物质有它们各自特定的荧光发射波长值,所以,可用它来鉴别各种荧光物质。

可以依据绘制其激发光谱曲线时所采用的最大激发波长值来确定某荧光物质的分子荧光波长值和绘制荧光光谱曲线。同一荧光物质的分子荧光发射光谱曲线的波长范围不因它的激发波长值的改变而位移。由于这一荧光特性,如果固定荧光最大发射波长(λem),然后改变激发波长(λex),并以纵坐标为荧光强度,横坐标为激发光波长绘图即获得激发光谱曲线,从中能确定最大激发波长(λex)。反之,固定最大激发光波波长值,测定不同发射波长时的荧光强度,即得荧光发射光谱曲线和最大荧光发射波长值。

仪器和试剂

荧光/磷光/分子发光光度计(ls55,美国PerkinElmer生产)。它的主要技术指标如下:测量波长范围:200-650 nm、光源:脉冲氙灯、测量模式:激发光谱,发射光谱,波长同步光谱,能量同步光谱、测量方式:定性、定量、三维扫描、荧光动力学

四面通石英比色皿一个(10mmx10mm)、10 mL具塞比色管、1mL/2 mL移液管、吸尔球、洗瓶、镜头纸

二氯荧光素(0.50μg/mL)标准工作溶液(内含1mol/L 氢氧化钠 5mL 和1mol/L 盐酸3ml)、 二次蒸馏水

实验步骤

1.配制浓度为0.50μg/mL的二氯荧光素溶液,准备好实验所需的器皿工具。

2.打开计算机、打印机和荧光光度计主机,预热5分钟。

3.对荧光光度计进行仪器初始化。

4.选择定性扫描模式。安装测量参数。依次在激发波长值分别为350nm/340nm/360nm,波长扫描范围为200-650nm,激发和发射波长狭缝宽度分别为 5nm,响应时间为10nm,扫描速度为1000时预扫描二氯荧光素的各发射光谱图,并且通过叠加的三份谱图分析和确定二氯荧光素的荧光发射峰。再确定最大发射波长值。

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