【文献分享】一文带你读懂T2T基因组文章策略 (大豆ZH13的T2T 完整基因组及其表观遗传修饰图谱)

【文献分享】一文带你读懂T2T基因组文章策略 (大豆ZH13的T2T 完整基因组及其表观遗传修饰图谱)本文详细介绍了 T2T 基因组的组装过程 包括使用不同测序技术和方法评估基因组质量

文章总结

建议大家看完文章都总结一下,要不然容易忘记。

格式可以参考:【经验分享】文献读完就忘?你是不是和我一样沮丧?-CSDN博客

T2T

T2T构建及表观遗传学思路

1. 组装了一个T2T基因组

  • 采用ont超长+hifi+BGI的二代短序列
  • 端粒+着丝粒(表+图):
  • 用CCCTAAA鉴定了端粒
  • 用Cent-Gm1 or CentGm2鉴定了着丝粒
  • 用BUSCO和Merqury估计了基因组质量
  • 着丝粒的Gap填充展示(全局+局部)+测序reads分布展示测序技术可靠性

2. 和ZH13v2 and Williams 82v4 基因组比较

  • 比较的染色体图
  • ZH13-T2T和两个基因组的共线性比较 (图) + Sequence and structural variations(表)
  • 同源基因和非同源基因展示+同源基因的共线性

3. 新基因的验证

  • 根、茎、叶表达量展示
  •  PCR和Sanger测序验证新的基因
  • PCR和Sanger测序验证gap

4. 构建表观遗传图谱

  • 数据:

        DNA甲基化数据:WGBS+ Nanopore(CG \CHG\CHH)

        组蛋白修饰 + ATAC-seq + HI-C

        WGBS和Nanopore的一致性比较:比较好;

        Nanopore能覆盖更多的胞嘧啶位点,尤其是在着丝粒区域

  • 染色体上分布的信号峰(局部+整体)
  • 不同类型的TE的修饰程度比较
  •  ATAC-seq:

        鉴定ATAC-seq的峰:

        ATAC的信号分布饼图

        峰附近的区域表现出低水平的DNA甲基化

        ATAC相关基因和不相关基因的表达量不对

         端粒和着丝粒区域的峰、以及存在GAP中的

        完成表观遗传图谱构建-epigenetics+gene结构+TE

5. 远距离DNA互作:HI-C

  • 鉴定了内外染色体的loop
  •  连接染色体loop,去构建染色体互作网络
  • 互作信号越强,染色质开放程度(ATAC)越高[15号染色体]
  • 一个基因跨越210kb与两个基因互作的例子
  •  qRT-PCR验证根茎叶的相对表达量
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编程小号
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