Western blot是科研过程中极为重要的一种实验方法,最终结果的判断离不开蛋白Marker。那么,什么是蛋白Marker?在实验中怎样选择适合的蛋白Marker呢?
一、什么是蛋白Marker?
即蛋白分子量标准,是一些已知分子量的蛋白质的混合物,像“尺子”一样用来指示蛋白条带所对应的分子量大小。
二、蛋白Marker的作用:
Ø 指示待测蛋白分子量大小
Ø 显示蛋白在凝胶上的电泳进度
Ø 判断转膜效率
Ø 协助标记各泳道加样顺序
三、蛋白Marker的分类:
非预染蛋白Marker | 单色/多色预染蛋白Marker | 显影预染蛋白Marker | |
组成 | 几种已知分子量的纯化蛋白预混液 | 几种已知分子量的纯化蛋白预混液蛋白与一种/多种染料共价耦联 | 几种已知分子量的纯化蛋白预混液蛋白与一种/多种染料共价耦联蛋白条带中含有lgG结合位点 |
优点 | 更精确:蛋白没有附带染料分子或者标记分子,所示大小正好是蛋白质原本的大小 | 有多种预示作用:当观察目标蛋白大小位置进入最佳分辨区时,停止电泳,以得到最佳分辨效果;转膜过程可以监测转膜效率,同时可以在膜上标记蛋白分子量。 | 可曝光显色:lgG结合位点会结合用于检测靶蛋白的一抗或二抗,使得蛋白Marker在印迹膜上可与目的条带一同呈现。 |
缺点 | 不便观察:在电泳过程中看不到Marker,电泳结束后经过蛋白染色后才能起指示作用,无法在实验过程中起预示作用 | 精确度较差:与染料共价耦联后,在不同的缓冲条件下,电泳迁移特性可能会发生某些变化,导致一些偏差 | 精确度较差:同左原料制备更复杂,价格同比较高 |
通过以上信息,您是否已经知道了要选择哪种类型的蛋白Marker了呢?
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经典:3个分子量范围蛋白Marker,可基本满足日常科研要求
便捷:即用型,上样前无需加热,无需添加还原剂
实用:多种预示作用,绿色条带固定为25KDa,红色条带固定为75KDa(除了BF06195,添加了红色最高条带310KDa),便于记忆和分辨
精准:更严格的质量控制,以帮助确保分子量指示更加精准
性价比超高
BF06193 BF06194 BF06195
注:Tris-Glycine,15% 分离胶
货号 | 名称 | 描述 |
BF06193 | 彩色预染标准分子量蛋白Marker(10-180KD) | 分子量满足绝大部分实验需求 |
BF06194 | 彩色预染蛋白Marker(10-245KD) | 分子量范围扩展,性价比最高 |
BF06195 | 彩色预染超高分子量蛋白Marker(10-310KD) | 适用于大分子量蛋白 |
今天的文章蛋白marker的作用_蛋白电泳marker分享到此就结束了,感谢您的阅读。
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